ヘルシンキラット顕微側壁動脈瘤モデル

ヘルシンキラット顕微手術側壁動脈瘤モデル。次のビデオでは、フィンランドのヘルシンキにある脳神経外科大学病院で開発されたラット顕微手術側壁動脈瘤モデルの最も重要な特徴について詳しく説明します。私たちは、ラットのハードウェアと消耗品で側壁動脈瘤の顕微手術作成を成功させるための重要で解剖学的および外科的な詳細について、段階的な手順の指示、必要な機器に関する情報を提示します。

小動物手術室は静かで無菌状態に保ち、室温を23プラスマイナス3度に維持する必要があります。実験的動脈瘤手術を行うには、以下の最小限の機器が必要です。卓上型顕微手術用顕微鏡には、アシスタンススコープとデジタル顕微鏡カメラが理想的に装備されています。

非多孔質の再利用可能な操作面と洗浄可能な機器の表面は、皮膚消毒剤、生理学的細胞株、小型および大型の実験ベンチ消耗品を保護するために使用されます。ゴールドスワップと縫合材料(9つのゼロマイクロ縫合糸を含む)。非吸収性縫合糸と吸収性フリーゼロ縫合糸を5本用意しています。

標準的な手術器具、手術用ハサミ、組織鉗子、軟部組織スプレッダー、または自己保持型リトラクター、および2つの蚊用手術用クランプが必要です。基本的なマイクロサージェリー機器セットには、湾曲したマイクロニードルホルダー、1つの湾曲したマイクロ鉗子と2つのストレートマイクロ鉗子、およびストレートまたはカーブしたマイクロハサミが含まれます。マイクロサージェリー器具は、滅菌細胞株で満たされた腎臓皿に入れて、器具を焦げ付きにくく清潔に保ちます。

手術中。腎臓皿には、マイクロ器具の先端の損傷を防ぐために、ゴム製のマットまたは手術用手袋が詰められています。さらに、血管クリップ アプリケーターと 3 つの一時的な血管非外傷性クランプが必要です。

使用するクランプは、ラット大動脈の非常に薄い壁の損傷を防ぐために、閉鎖力が低いことが重要です。また、半ミリメートルスケールバー、小さな色のゴムパッド、短い鈍い針麻酔ラットを重量で調整した定規を準備し、塩酸マイネの皮下注射、キログラムあたり0.4ミリグラム、塩酸ケトミンの腹腔内注射60ミリグラム/キログラムのテストで、ラットが皮膚とセッションの前に完全に無菌であることを確認するための2ピンチ反射の欠如についてテストします。手術中は、呼吸数、心拍数、有害な刺激に対する反応を追跡することにより、麻酔の死を15分ごとに監視します。

術後および鎮痛のために、1キログラムあたり0.03ミリグラムのブプレノルフィンの皮下注射が行われ、必要に応じて繰り返されます。12時間ごとにジュラ紀の大動脈から移植片を採取します。ラットを仰臥位に置き、皮膚に伸縮や圧迫を加えることなく、外科用テープで前部と後部の両方のパルスを固定します。

胸腔を開く前に、ラットが完全に反応しなくなることを確認するために、有害な2ピンチ刺激を適用します。胸腔を開いた直後に、ラットは塩酸ケタミンの心臓内注射による過剰投与によって犠牲にされ、肺は心臓の右側に動員されます。肺幹、左鎖骨下静脈、左頭蓋静脈、CVAおよびATU静脈は、目立つ静脈への近位胸部大動脈の収穫を妨げます。

マイクロハサミとマイクロ鉗子を使用して下行胸部大動脈の解剖を開始するための良いエントリーポイントがあります。胸部大動脈をトックスの背壁から上に向かって大動脈弓までさかのぼり、穏やかに鈍く引き込み、蚊の手術用クランプで解剖し、風をクランプしてからハサミで切断します。クランプは衰え部に維持され、下にある大動脈弓を露出させるためのリトラクターとして使用されます。

結紮糸は、大動脈を離れる最初の肋間動脈のすぐ上に配置されます。次に、下行大動脈は左鎖骨下動脈のすぐ下を切断し、次に結紮糸の下に切断します。夢見ることは、垂直に標準化された動脈瘤の形状を取得するために、または必要に応じて動脈瘤の軸と大動脈との間の特定の角度を取得するために行うことができます。

グラフトは、その幅と長さで測定されます。採取された移植片は、直ちにレシピエントラットに移植するか、またはさらに処理して移植片の脱細胞化を達成することができます。壁。脱細胞化移植片は、再移植まで摂氏マイナス4度で保存できます。

後日。動脈瘤壁の脱細胞化は、動脈瘤が動脈瘤の創造を拡大する素因となることが示されています動物が麻酔された後、手術部位から毛皮を切り取り、適切な消毒剤で皮膚をきれいにし、ラットを仰臥位に置き、皮膚に伸縮または圧迫を加えることなく、手術用テープで前部と後部の両方の脈拍を固定し、 太いマーカーまたはERYペンで背中を曲げ、背中の腰部の下に置きます。後腹膜への曝露と、皮膚切開前にラットが完全かつ整合していることを確認するための2ピンチ反射の欠如に対する顕微手術用吻合試験を容易にする腎下大動脈へのアクセスを改善するためには、できるだけ多くの腰椎前弯を取得することが重要です。

正中線切開後、小腸と隆起したサウムを右または左に移動します。小腸と下行結腸との間の靭帯は、頭蓋方向に切断されます。背側体壁の露出を広げるために、腸を離して保持するために自己保持リトラクターが配置されています。

内皮動脈瘤吻合の理想的な位置は、腎臓静脈と腸骨静脈の間のレベルにあります。腹部大動脈は、解剖中に脂肪組織に埋め込まれた後腹膜にあります。対になったほぼ透明な尿管と精巣の血管には特に注意を払う必要があります。

腸のさらなる収縮が必要です。より大きなゴーストスワブを使用できます。背側体壁の腹側表面は、薄い腹膜周囲で覆われています。

これが開かれると、腹部大動脈の慎重で鋭く鈍い解剖中に、大動脈のすぐ下を視覚化できます。血管壁の損傷を避けるために、アドビアのみをつかむ必要があります。多くの場合、小さな腰椎動脈が腹部大動脈の背側表面から分節血管として発生し、準備を妨げます。

湾曲したマイクロ鉗子を使用すると、結紮を容易にすることができます。逆行性のにじみ出るのを避けるために、血管の深さライゲーションと切断に配置する必要があります。動脈瘤縫合中、色付きのゴムパッドを腹部大動脈の下に置き、小さな原因の綿棒で布張りします 緩い結合組織とAIAは、計画された吻合部位のレベルで除去されます。

腹部大動脈は、最初に吻合部の遠位に固定され、次に近位に固定されます。これにより、血管のしっかりとした充填が保証され、その後の動脈の切開が容易になります。動脈の耳切り術は、直線または湾曲したマイクロハサミを使用して行われます。

マイクロ鉗子は、血管壁の非常に小さな部分を支えて楕円形を切り取ります。動脈は、先端が鈍い針を使用して、細胞株で両方向に完全に洗い流されます。この端から側への吻合の最初の 2 つの縫合糸は、動脈耳切開の近位端と遠位端に配置されます。

その時点で、縫合は連続縫合糸または中断縫合糸のいずれかとして行われます。中断縫合を選択した場合、裏側の9時方向の縫合糸が配置されます。まずは。マイクロ鉗子で血管壁をつかむのを避けます。

可能な限り、各縫合糸が壁のすべての層に配置されていることを確認してください。その後の縫合糸は、それぞれ最初の縫合糸のワイル壁に隣接して間隔を空けることができます。AIAは慎重につかみ、圧迫したり、内膜をつかんだりしないようにします。

後壁が完成したら、吻合部の管腔内部分を確認します。縫合糸の位置を間違えた場合、同じ手順を同じ順序で吻合の前面で行うようになりました、特に合計3つの結び目の最初のもの。手順はしっかりしている必要がありますが、きつすぎないようにする必要があります。

エンドサイトーシスが完了した後、その部位を細胞株ですすぎ、逆流を可能にするために最初に遠位クランプを取り外します。逆流による明らかな出血が発生した場合は、追加のステッチが必要になる場合があります。軽度のにじみ出る場合は、出血側に穏やかな圧力をかけることで止血が可能です。

ゴーストスワップの小さな部分を使用します。次に、近位血管クランプを取り外します。吻合側をもう一度すすぎ、動脈瘤の運命で結紮糸の残りの端が切断された遠位腹部の動脈開存性が評価されます 直接搾乳試験を通じて。

プラスチックシートとその下にある小さなゴーストスワブが取り除かれます。作成された動脈瘤内の脈動する血液がはっきりと見えます。吻合部の周りの縫合線は、脂肪組織の小片で覆うか、追加の止血のためにポンゴスタンドで覆うことができます。

まだ小さなにじみがある場合は、軟部組織スプレッダーとガーゼ綿棒を取り除きます。結論として、ヘルシンキラット動脈瘤モデルは、親動脈に対する動脈瘤のサイズ、形状、および幾何学的構成によって標準化された実験的動脈瘤を作成するための、迅速で手頃な価格の一貫した方法です。