È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:45Preparation of the Density Gradient Fraction System and Sucrose Gradients
- 03:04Preparation of Cell Extracts
- 05:10Loading Extracts onto Sucrose Gradients and Ultracentrifugation
- 06:03Fractionation of Cytoplasmic Extracts for Polysome Profiling
- 06:46Extraction of Protein and RNA for Analysis
- 08:45Results: Polysome Profiling Detects Changes in Translation Initiation in Response to Stress Conditions
- 10:01Conclusion
Her beskriver vi en metode til at analysere ændringer i initiering af mRNA-translation af eukaryote celler som reaktion på stress-tilstande. Denne metode er baseret på hastigheden separation på saccharosegradienter med oversættelse ribosomer fra ikke-translating ribosomer.
