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Scoprire le interazioni proteina e caratterizzazione di proteine ​​Funzione Con HaloTag Tecnologia
JoVE Journal
Biologia
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JoVE Journal Biologia
Discovering Protein Interactions and Characterizing Protein Function Using HaloTag Technology
DOI:

11:16 min

July 12, 2014

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Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:23Protein Pulldowns: Preparation of Transiently Transfected Cells
  • 02:50Equilibration of the HaloLink Resin
  • 04:01Binding and Washing of Fusion Complexes
  • 06:21SDS Elution for Denaturing Gels, Western Blots, or Mass Spectrometry
  • 07:07Cellular Imaging of Fluorescently Labeled Fusion Proteins Using a Cytoplasmic and Nuclear Permeable Ligand
  • 08:48Results: Using HaloTag Technology to Determine Protein Interactions and Localization
  • 10:47Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Tecnologia HaloTag è una tecnologia multifunzionale che ha mostrato un significativo successo in isolamento di piccole e grandi complessi proteici da cellule di mammifero. Qui si segnalano i vantaggi di questa tecnologia rispetto alle alternative esistenti e dimostrare la sua utilità per studiare numerosi aspetti della funzione delle proteine ​​all'interno delle cellule eucariotiche.

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