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Whole-Mount In Situ Hybridization
  • 00:00Panoramica
  • 00:56Concepts Behind In Situ Hybridization
  • 02:27Target Identification and Probe Development
  • 05:15Applications
  • 07:17Summary

Hibridación In Situ de montaje completo

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Panoramica

Conjunto de montaje en situ hibridación (WMISH) es una técnica común utilizada para la visualización de la ubicación de RNAs expresadas en embriones. En este proceso, sintéticamente producidas sondas de RNA son primera complementariamente obligado o “cruzado por hibridación,” a la transcripción de genes diana. Inmunohistoquímica o fluorescencia se utiliza entonces para detectar estos híbridos de ARN, revelando los patrones espaciales y temporales de la expresión génica. A diferencia de los tradicionales en situ hibridación técnicas, que requieren de secciones del tejido fino cuyas imágenes se necesitan reensamblarse computacionalmente, la técnica de montaje de conjunto permite gene patrones de la expresión a evaluar sobre el embrión entero o estructura.

Este video presenta los conceptos básicos de Monte toda la coloración y el detalle claves procesales, incluyendo el diseño de la sonda y producción, fijación de embriones y tinción y detección de señales de hibridación posterior. Los espectadores aprenderán entonces sobre cómo desarrollo biólogos están aplicando WMISH a estudios de investigación actuales.

Procedura

Conjunto de montaje en situ el hibridación es una técnica poderosa que permite a los científicos a entender las bases moleculares del desarrollo embrionario. “Whole-mount” indica que el embrión entero se utiliza, no sólo un trozo de tejido. “In situ” es un frase en latín que significa “lugar.” Y por último, la “hibridación” se refiere a la Unión complementaria de una molécula de ARN sintético producida a una transcripción de mRNA dentro de la célula de un organismo. Este video muest…

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Whole-Mount In Situ Hybridization. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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