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Capitoli
- 00:05Titolo
- 00:43Synthesis of NNS Sub-libraries for Each Amino Acid Position by Two-step PCR Site-directed Mutagenesis
- 01:53Cloning of NNS Sub-libraries into Selection Vectors
- 03:47Selection of the TEM-1 Whole-Protein Saturation Mutagenesis Library for Antibiotic Resistance
- 05:51High Throughput Sequencing to Determine Fitness Effects of Mutations
- 08:44Results: High Throughput Sequencing from Whole-Protein Saturation Mutagenesis
- 10:16Conclusion
हम उच्च throughput अनुक्रमण के उपयोग प्रोटीन का व्यापक एकल साइट संतृप्ति म्युटाजेनेसिस पुस्तकालयों के कार्यात्मक मूल्यांकन के लिए एक प्रोटोकॉल उपस्थित थे। महत्वपूर्ण बात है, इस दृष्टिकोण orthogonal प्राइमर जोड़े का उपयोग करता पुस्तकालय निर्माण और अनुक्रमण मल्टीप्लेक्स। मंदिर-1 β-lactamase एम्पीसिलीन की एक चिकित्सकीय प्रासंगिक खुराक पर चयनित का उपयोग कर प्रतिनिधि परिणाम प्रदान की जाती हैं।
