/
/
SNARE-gemedieerde Fusie van Single proteoliposomen met Tethered Ondersteund dubbellagen in een microfluïdische Flow Cell gecontroleerd door gepolariseerde TIRF Microscopie
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
1Department of Cellular and Molecular Physiology,Yale University School of Medicine, 2Nanobiology Institute,Yale University, 3Department of Molecular Biophysics and Biochemistry,Yale University, 4Laboratoire de Neurophotonique, Université Paris Descartes, Faculté des Sciences Fondamentales et Biomédicales,Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:01Preparation of a PDMS Block to Form the Microfluidic Channel
- 03:17Formation of the Tethered Supported Bilayer
- 06:18Checking Bilayer Fluidity
- 07:06Introducing v-SUVs into the Microfluidic Channels
- 07:59Observing the Fusion of Single v-SUVs and the SBL
- 08:42Results: Docking and Fusion Events Described by Lipid and Content Release
- 10:26Conclusion
Hier presenteren we een protocol om enkele, SNARE-bemiddelde fusie gebeurtenissen tussen liposomen en ondersteund dubbellagen in microfluïdische kanalen met gepolariseerde TIRFM, met 'single molecule gevoeligheid en ~ 15 msec tijdsresolutie te detecteren. Lipide en oplosbare lading afgifte kan gelijktijdig worden gedetecteerd. Liposoom grootte, lipide diffusie, en fusie porie eigenschappen worden gemeten.
