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Fusion SNARE-médiée de Single protéoliposomes avec bicouches supportées Tethered dans une cellule microfluidique débit contrôlé par Polarized FRBR Microscopie
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1Department of Cellular and Molecular Physiology,Yale University School of Medicine, 2Nanobiology Institute,Yale University, 3Department of Molecular Biophysics and Biochemistry,Yale University, 4Laboratoire de Neurophotonique, Université Paris Descartes, Faculté des Sciences Fondamentales et Biomédicales,Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:01Preparation of a PDMS Block to Form the Microfluidic Channel
- 03:17Formation of the Tethered Supported Bilayer
- 06:18Checking Bilayer Fluidity
- 07:06Introducing v-SUVs into the Microfluidic Channels
- 07:59Observing the Fusion of Single v-SUVs and the SBL
- 08:42Results: Docking and Fusion Events Described by Lipid and Content Release
- 10:26Conclusion
Ici, nous présentons un protocole pour détecter un seul, les événements de fusion SNARE médiation entre liposomes et bicouches pris en charge dans des canaux microfluidiques utilisant TIRFM polarisée, avec une sensibilité et une seule molécule ~ 15 résolution temporelle msec. Lipid et la libération de la cargaison soluble peuvent être détectés simultanément. la taille des liposomes, des lipides diffusivité et la fusion des pores propriétés sont mesurées.
