/
/
מלכודת בתיווך Fusion של יחיד Proteoliposomes עם Bilayers Tethered הנתמך בתוך תא זרימת Microfluidic מנוטר על ידי Polarized TIRF מיקרוסקופי
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
1Department of Cellular and Molecular Physiology,Yale University School of Medicine, 2Nanobiology Institute,Yale University, 3Department of Molecular Biophysics and Biochemistry,Yale University, 4Laboratoire de Neurophotonique, Université Paris Descartes, Faculté des Sciences Fondamentales et Biomédicales,Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:01Preparation of a PDMS Block to Form the Microfluidic Channel
- 03:17Formation of the Tethered Supported Bilayer
- 06:18Checking Bilayer Fluidity
- 07:06Introducing v-SUVs into the Microfluidic Channels
- 07:59Observing the Fusion of Single v-SUVs and the SBL
- 08:42Results: Docking and Fusion Events Described by Lipid and Content Release
- 10:26Conclusion
כאן, אנו מציגים פרוטוקול לזהות אירועי היתוך אחד, בתיווך מלכודת בין ליפוזומים bilayers נתמך ערוצי microfluidic באמצעות TIRFM המקוטב, עם רגישות מולקולה בודדת ~ 15 ברזולוצית זמן msec. ליפידים ושחרור מטען מסיס ניתן לאתר בו זמנית. Liposome גודל, diffusivity שומנים, ואת הנקבוביות היתוך מאפיינים נמדדים.
