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Fusion SNARE-mediata del singolo proteoliposomi con bilayers Tethered supportati in una cella di flusso Microfluidic monitorati da polarizzata microscopia TIRF
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1Department of Cellular and Molecular Physiology,Yale University School of Medicine, 2Nanobiology Institute,Yale University, 3Department of Molecular Biophysics and Biochemistry,Yale University, 4Laboratoire de Neurophotonique, Université Paris Descartes, Faculté des Sciences Fondamentales et Biomédicales,Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:01Preparation of a PDMS Block to Form the Microfluidic Channel
- 03:17Formation of the Tethered Supported Bilayer
- 06:18Checking Bilayer Fluidity
- 07:06Introducing v-SUVs into the Microfluidic Channels
- 07:59Observing the Fusion of Single v-SUVs and the SBL
- 08:42Results: Docking and Fusion Events Described by Lipid and Content Release
- 10:26Conclusion
Qui, vi presentiamo un protocollo per rilevare, eventi di fusione singoli SNARE-mediata tra liposomi e bistrati supportati in canali microfluidica utilizzando TIRFM polarizzata, con sensibilità singola molecola e ~ 15 risoluzione temporale msec. Lipidi e il rilascio del carico solubili possono essere rilevati simultaneamente. dimensioni liposomi, diffusività dei lipidi, e poro di fusione proprietà sono misurate.
