/
/
Identification fiable de la vie Neurones Dopaminergiques dans les cultures Mésencéphale utilisant l'ARN Séquençage et TH-promoteur-driven eGFP Expression
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 00:59Isolation of Embryonic Midbrain
- 02:55Dissociation and Plating of Cells
- 05:34Harvesting Cultured Dopaminergic Neurons for RNA Sequencing
- 07:04Generation, Purification and Amplification of First-strand cDNA
- 09:13Results: RNA-seq Detection of Expressed Transcripts in Single Dopaminergic Neurons
- 09:39Conclusion
Dans la maladie de Parkinson (PD), substantia nigra (SNC) neurones dopaminergiques dégénèrent, entraînant un dysfonctionnement du moteur. Nous rapportons ici un protocole pour la culture de neurones mésencéphaliques ventraux provenant d'une souris exprimant eGFP entraînée par une séquence de promoteur de tyrosine-hydroxylase (TH), la récolte des neurones fluorescents individuels à partir des cultures, et en mesurant leur transcriptome en utilisant l'ARN-seq.
