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Zuverlässige Identifikation von Wohn dopaminerge Neurone in Mittelhirns Kulturen unter Verwendung von RNA-Sequenzierung und TH-Promotor getriebene eGFP Expression
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Capitoli
- 00:05Titolo
- 00:59Isolation of Embryonic Midbrain
- 02:55Dissociation and Plating of Cells
- 05:34Harvesting Cultured Dopaminergic Neurons for RNA Sequencing
- 07:04Generation, Purification and Amplification of First-strand cDNA
- 09:13Results: RNA-seq Detection of Expressed Transcripts in Single Dopaminergic Neurons
- 09:39Conclusion
Bei der Parkinson-Krankheit (PD), Substantia Nigra (SNC) dopaminergen Neuronen degenerieren, was zu Motorstörungen. Hier berichten wir über ein Protokoll zur Kultivierung von ventralen Mittelhirns Neuronen aus einer Maus eGFP durch eine Tyrosinhydroxylase (TH) Promotorsequenz angetrieben exprimieren, Ernten einzelnen fluoreszierenden Neuronen aus den Kulturen, und die Messung ihrer Transkriptom RNA-seq verwenden.
