È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:03Reconstitution of a Histone Octamer with Differentially Isotope-labeled and Asymmetrically-modified Histone H3
- 03:20Tandem Affinity Purification of Reconstituted Octamer
- 05:28Nucleosome Reconstitution
- 07:07Results: Generation of Differentially Isotope-labeled Nucleosomes for Investigating Cross-talk Mechanisms
- 08:58Conclusion
Denne protokollen beskriver tilberedning av nukleosomer inneholder differensielt isotop-merkede søster histoner. På samme tid, kan asymmetrisk post-translasjonelt modifisert nukleosomer bli generert etter bruk av en premodified histon kopi. Disse preparatene kan lett brukes til å studere modifikasjon krysstalemekanismer, samtidig på begge søster histoner, ved hjelp av høy-oppløsning NMR-spektroskopi.
