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La détection de G Protein-Coupled Receptor Internalisation activé de ligand par microscopie confocale
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Detection of Ligand-activated G Protein-coupled Receptor Internalization by Confocal Microscopy
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La détection de G Protein-Coupled Receptor Internalisation activé de ligand par microscopie confocale

DOI:
10.3791/55514-v

•

10:24 min

•

April 09, 2017

•

, , , , ,
1National Engineering Research Center of Marine Facilities Aquaculture, Marine Science College,Zhejiang Ocean University, 2Institute of Biochemistry, College of Life Sciences,Zhejiang University

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 00:49Cell Seeding
  • 02:05Cell Transfection Method 1 with Liposome Formulations
  • 03:44Cell Culture on Coverslips
  • 04:37Cellular Localization Using Confocal Microscopy
  • 05:47Cellular Internalization
  • 06:42Confocal Microscopy
  • 07:43Results: Gonadotropin Releasing Hormone Receptor Internalization Detection
  • 09:21Conclusion

Summary

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Ce protocole décrit la détection de la microscopie confocale de l'internalisation du récepteur (GPCR) couplé à la protéine G dans les cellules de mammifères. Il comprend la culture de cellules de base, la transfection et la procédure de microscopie confocale et fournit une méthode efficace et facilement interprétable pour détecter la localisation subcellulaire et intériorisation des GPCR de fusion exprimée.

Tags

GPCRLigand-activatedInternalizationConfocal MicroscopySubcellular LocalizationReceptor RecyclingHEK293 CellsTransfectionPlasmid DNAReduced Serum MediumReagentDMEMFBS

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