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Espressione proteica ricombinante, cristallizzazione e studi biofisici di a<em> Bacillus</em> -conservato nucleotide pirofosforilasi, BcMazG
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JoVE Journal Biochimica
Recombinant Protein Expression, Crystallization, and Biophysical Studies of a Bacillus-conserved Nucleotide Pyrophosphorylase, BcMazG
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Espressione proteica ricombinante, cristallizzazione e studi biofisici di a<em> Bacillus</em> -conservato nucleotide pirofosforilasi, BcMazG

DOI:
10.3791/55576-v

•

12:23 min

•

May 16, 2017

•

, ,
1Division of Biological Science and Technology,Yonsei University

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 00:55Recombinant Protein Production and Purification of rBC1531
  • 04:47Removal of Affinity Tags by Thrombin Proteolysis
  • 06:32Crystallization Screening and Optimization of rBC1531
  • 07:30Colorimetric NTPase Assay
  • 08:33Results: Purification, Characterization, and Crystallization of rBC1531
  • 10:31Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Bacillus anthracis è il patogeno obbligato di antrace fatale inalatorio, per cui studi di geni e proteine ​​sono strettamente regolamentati. Un approccio alternativo è quello di studiare geni ortologi. Descriviamo studi biofisicochimici di un B. ortologo di B. anthracis di B. cereus , bc1531, che richiede una minima quantità di apparecchiature sperimentali e mancano gravi preoccupazioni di sicurezza.

Tags

Keywords: Recombinant ProteinBacillusNucleotide PyrophosphorylaseBcMazGProtein ExpressionProtein CrystallizationBiophysical StudiesE. ColiChemically Competent CellsTransformationPlasmid DNADNA SequencingProtein PurificationIPTG InductionCell LysisProtein Characterization

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