È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:20Cell Culture
- 03:00Cell Treatment with Cell Compounds and HDAC Substrates, Cell Lysis, and Sample Preparation for UHPLC-ESI-MS/MS
- 05:14UHPLC/MS-MS Analysis and Data Analysis
- 06:14Results: Deacetylation of Specific Substrates by Endogenous HDACs and Potency of Standard HDAC Inhibitors
- 08:18Conclusion
La présente méthode sert à identifier les inhibiteurs de l’isoforme spécifique des histones désacétylases (HDAC) dans les cellules HeLa par l’analyse UHPLC-MS de plusieurs substrats. Il s’agit d’une méthode sans anticorps mis au point afin de tenir compte de l’activité HDAC1 et HDAC6 dans la vie cellule environnement, contrairement à l’isoforme unique acellulaire dosages.
