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Ciblage des Thiols de cystéine pour in Vitro in situ Glycosylation des protéines recombinantes
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Capitoli
- 00:05Titolo
- 01:09Polymerase Chain Reaction (PCR)-mediated Site-directed Mutagenesis
- 03:44Uniform 15N-labeled Protein Expression in BL21 ΔE3 E. coli
- 05:24Purification of Recombinant Protein from E. coli
- 07:50Chemical Attachment of Glucose-5-MTS to Protein by Dialysis
- 08:48Results: Site-selective Cys Mutation Followed by In Vitro Glycosylation in STIM1 EF-SAM Protein
- 10:11Conclusion
Des analyses biochimiques et structurales des protéines glycosylées exigent des quantités relativement importantes des échantillons homogènes. Nous présentons ici une méthode chimique efficace pour in site glycosylation des protéines recombinantes purifiée à partir de bactéries en ciblant les réactifs Cys thiols.
