Lucioles, l’enzyme luciférase convertit un composé appelé la luciférine en oxyluciferin, en produit de lumière ou « luminescence » en conséquence. Cette réaction utilise l’énergie issue de ATP afin d’aller de l’avant, donc les chercheurs ont exploité l’interaction de la luciférine-luciférase afin de mesurer les niveaux d’ATP dans les cellules. Étant donné le rôle de monnaie de la cellule d’énergie de l’ATP, le test de bioluminescence ATP peut donnent un aperçu de métabolisme cellulaire et la santé globale de cellule.
Dans cette vidéo, JoVE discute de la respiration cellulaire, examinant plus précisément comment le métabolisme du glucose entraîne la production d’ATP. Il est suivi par les principes qui sous-tendent le test de bioluminescence ATP et un protocole généralisé pour cette technique. Enfin, une étude de comment les chercheurs utilisent actuellement le test de bioluminescence ATP pour évaluer la viabilité des cellules dans une variété de conditions expérimentales.
Procedura
Le test de bioluminescence ATP est une technique courante utilisée pour quantifier les niveaux d’ATP et de détecter les cellules vivantes, métaboliquement actives. ATP ou adénosine triphosphate est la principale source d’énergie pour tous les organismes vivants, et par « tout » ce que nous entendons tous. Au niveau cellulaire, l’ATP est généré grâce à un ensemble de processus métaboliques, appelé respiration cellulaire.Aujourd’hui, nous discuterons brièvement les voies impliquées dans la resp…