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Detecting Reactive Oxygen Species
  • 00:00Panoramica
  • 01:15Cell Metabolism, Disease and ROS
  • 03:43Principles of ROS Measurement Using a Fluorescent Probe
  • 04:52Generalized Protocol for Measuring ROS
  • 05:52Applications
  • 08:16Summary

Rilevamento delle specie reattive dell'ossigeno

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Panoramica

Le specie reattive dell’ossigeno sono molecole chimicamente attive, derivate dall’ossigeno, in grado di ossidare altre molecole. A causa della loro natura reattiva, ci sono molti effetti deleteri associati alla produzione incontrollata di ROS, compresi i danni strutturali al DNA e ad altre molecole biologiche. Tuttavia, i ROS possono anche essere mediatori della segnalazione fisiologica. Ci sono prove accumulate che i ROS svolgono ruoli significativi in tutto, dall’attivazione dei fattori di trascrizione alla mediazione della tossicità infiammatoria che uccide i patogeni estranei e difende il corpo.

In questo video approfondiremo le associazioni tra ROS, metabolismo e malattia. Dopo aver stabilito il loro significato, discuteremo i principi e un protocollo di una metodologia comunemente usata per misurare i livelli di ROS nelle cellule: l’uso di sonde non fluorescenti che diventano fluorescenti dopo l’ossidazione. Infine, esamineremo alcune applicazioni attuali di questa tecnica nella ricerca sulla biologia cellulare.

Procedura

Le specie reattive dell’ossigeno prodotte nelle cellule sono state implicate nell’omeostasi dei tessuti, nell’invecchiamento cellulare e in stati patologici come il cancro. Come suggerisce il nome, queste molecole derivano dall’ossigeno, che esiste naturalmente come una molecola stabile e diossigena poiché tutti i suoi elettroni sono accoppiati. L’aggiunta di un elettrone spaiato lo rende instabile e porta alla formazione dell’anione superossido, una forma di specie reattive dell’ossigeno o ROS. Oltre all’anione superossi…

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Detecting Reactive Oxygen Species. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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