December 22nd, 2017
我们在这里描述下腔静脉狭窄是深静脉血栓形成的小鼠模型。该模型重述血流限制, 是人类静脉血栓形成的主要诱因之一。
该外科手术的总体目标是创建下腔静脉狭窄,以模拟血流扭曲,从而开始深静脉血栓形成。这种方法可以帮助回答静脉血栓形成领域关于深静脉血栓形成开始机制的关键问题。该技术的主要优点是它模拟了血流紊乱,这是静脉血栓形成开始的关键机制。
这种方法的视觉演示至关重要,因为很难用语言解释将下腔静脉与主动脉分离并在这些组织之间打孔。首先剃掉 8 到 12 周大的麻醉 19 到 25 克小鼠的腹部,然后将鼠标仰卧在加热垫上。使用无菌棉签用抗菌溶液对裸露的皮肤消毒 3 次。
通过对脚趾捏无反应来确认适当的镇静水平,并用无菌窗帘覆盖鼠标,并在手术部位上开一个孔。在解剖显微镜下,从胸骨下方 1.5 厘米开始,沿腹部中线切开一个切口,并使用棉签将肠道向动物左侧外侧。用浸泡在 37 摄氏度盐水中的无菌纱布覆盖肠道组织。
放置组织牵开器以扩大切口并定位下腔静脉 (IVC) 及其侧支位于左肾静脉尾部。使用镊子拉起侧枝周围的脂肪组织,然后使用第二个镊子在树枝下方挖隧道。并用 7-0 惰性 prolene 缝合线尽可能靠近 IVC 连接所有侧支。
用镊子夹住周围组织,向上和向左拉动 IVC,以在 IVC 和主动脉之间的小区域产生张力,正是在 IVC 和左肾静脉之间。在主动脉和 IVC 之间插入第二对镊子,打开和关闭镊子不超过 3 到 5 次以打孔。在 IVC 与左肾静脉汇合处精确打孔非常重要。
用左手将一块 2 厘米长的 7-0 惰性缝合线放入腹膜腔左侧,靠近 IVC,然后将 IVC 向上拉并再次向左拉。将第二把镊子插入主动脉和 IVC 之间的孔中,使尖端出现在 IVC 的另一侧,然后将缝合线从孔中拉回。打一个松散的临时结,然后将一个 30 号的针垫片弯曲成钩子,放入结中。
收紧结后,取下垫片,用棉签将肠道返回腹膜腔。使用连续环,用 6-0 VICRYL 缝合线缝合腹膜,并用金属订书钉缝合皮肤。皮下注射小鼠 0.5 毫升 37 摄氏度的葡萄糖盐水。
然后,将鼠标放入 25 摄氏度腔室中的单个笼子中,该笼子里装有食物和凝胶水,并监测直至完全恢复。IVC 狭窄的诱导导致血流扭曲和停滞,导致血栓的发展,该血栓在结构上类似于在人类中观察到的深静脉血栓,并且很容易在肉眼下看到。此外,在该 IVC 狭窄模型中,在血浆中观察到升高的 D-二聚体,这是纤维蛋白降解的产物,表明存在类似于人类的活跃血栓形成过程。
尽管大多数实验动物在该模型中产生血栓,但一个主要缺点是动物之间观察到的血栓大小的变化。一旦掌握,如果执行得当,这项技术可以在 15 分钟内完成。开发后,这项技术为静脉血栓形成领域的研究人员在小鼠模型中探索 DVT 的机制铺平了道路。
本文通过在下腔静脉(IVC)中创建狭窄,介绍了一种深静脉血栓形成(DVT)的小鼠模型。该模型有效地模拟了血流受限,这是人类静脉血栓形成发生的重要因素。