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JoVE Journal Immunologia e infezioni
A Facile Protocol to Generate Site-Specifically Acetylated Proteins in Escherichia Coli
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Eine einfache Protokoll ortspezifisch generieren acetyliert Proteine in Escherichia Coli

DOI:
10.3791/57061-v

•

11:08 min

•

December 09, 2017

•

, , , ,
1Department of Chemistry and Biochemistry,University of Arkansas, 2Cell and Molecular Biology Program,University of Arkansas, 3Department of Biological Sciences,University of Arkansas, 4Fayetteville High School

Capitoli

  • 00:00Titolo
  • 00:09Introduction
  • 01:03Protocol
  • 01:07Introducing the Stop Codon into the Target Gene
  • 02:58Expressing and Purifying Site-specifically Acetylated Protein
  • 06:21Biochemically Characterizing Acetylated Protein
  • 09:39Risultati
  • 10:37Summary

Summary

Traduzione automatica

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Erweiterung des genetischen Codes dient als ein mächtiges Werkzeug für eine Vielzahl von biologischen Prozessen, einschließlich Protein Acetylierung zu studieren. Hier zeigen wir, dass eine einfache Protokoll nutzen diese Technik zur Erzeugung von homogen Proteine an bestimmten Standorten in Escherichia coli Zellen acetyliert.

Tags

Keywords: Site-specific AcetylationProtein AcetylationGenetic Code ExpansionPyrrolysyl-tRNA SynthetaseAmber Stop CodonE. Coli ExpressionSite-directed MutagenesisAcetyllysine Incorporation

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