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Isolement des mastocytes dérivé de péritoine et leur caractérisation fonctionnelle avec Ca2 +-imagerie et des essais de dégranulation
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JoVE Journal Immunologia e infezioni
Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca2+-imaging and Degranulation Assays
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Isolement des mastocytes dérivé de péritoine et leur caractérisation fonctionnelle avec Ca2 +-imagerie et des essais de dégranulation

DOI:
10.3791/57222-v

•

11:31 min

•

July 04, 2018

•

, , ,
1Institute of Pharmacology,Ruprecht-Karls Heidelberg University

Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 00:38PMC Isolation and Cultivation by Intraperitoneal Lavage
  • 03:14Fluorometric Intracellular Free Calcium Concentration Measurement in PMCs
  • 06:38Beta-hexosaminidase Release Measurement in PMCs
  • 08:46Results: Beta-hexosaminidase Release Colorimetric Multi-well Measurements Performed with PMCs Isolated from Wild Type Mice
  • 10:14Conclusion

Summary

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Nous présentons ici un protocole visant à isoler et à cultiver des mastocytes péritonéaux murines. Nous décrivons également deux protocoles pour leur caractérisation fonctionnelle : une imagerie fluorescente de concentration2 + Ca libre intracellulaire et un test de dégranulation issu de dosage colorimétrique de la β-hexosaminidase libéré.

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Keywords: PeritoneumMast CellsCalcium ImagingDegranulationIntracellular SignalingExcitable CellsIon ChannelsImmune Cell ActivationMediator ReleaseFura-2RPMI MediumPeritoneal CavityCell SuspensionIL-3SCFIgE Receptors

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