Rivista
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बायोटिन आधारित Pulldown परख सेलुलर miRNAs के mRNA लक्ष्यों को मान्य करने के लिए
JoVE Journal
Genetica
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JoVE Journal Genetica
Biotin-based Pulldown Assay to Validate mRNA Targets of Cellular miRNAs
DOI:

11:00 min

June 12, 2018

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Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 01:34Preparation of Streptavidin Coated Magnetic Beads — I
  • 03:52Preparation of Cell Lysate
  • 05:36Preparation of Streptavidin Magnetic Beads — II
  • 06:34Pull-down of Target mRNA-miRNA Complexes
  • 07:35Total RNA Extracted, cDNA Synthesis, and qPCR
  • 08:57Results: Use of MicroRNAs to Capture the Target mRNA
  • 09:55Conclusion

Summary

Traduzione automatica

इस रिपोर्ट में सेल्युलर miRNAs के mRNA लक्ष्यों को मान्य करने के लिए एक तेज़ और विश्वसनीय विधि का वर्णन है । विधि सिंथेटिक biotinylated बंद न्यूक्लिक एसिड (LNA) का उपयोग करता है आधारित miRNA नकल लक्ष्य mRNA पर कब्जा करने के लिए । इसके बाद, streptavidin-लेपित चुंबकीय मोतियों को qPCR पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन द्वारा ठहराव के लिए लक्ष्य mRNA को pulldown करने के लिए कार्यरत हैं ।

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