È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:54TRPV1 Mutagenesis
- 02:19Generating the Recombinant Bacmid and Baculovirus for Protein Expression
- 05:14eTRPV1 and Single-cysteine Mutant Purification
- 07:18eTRPV1 Single-cysteine Mutant Site-directed Spin Labeling
- 08:12eTRPV1 Spin-labeled Single Cysteine Mutant Reconstitution
- 09:30Results: Characterization of the Minimal Cysteine-less TRPV1 Construct and Single-cysteine Mutants used for Spectroscopic Analysis
- 11:08Conclusion
Denne artikel beskriver specifikke metoder til at opnå biokemiske mængder af vaskemiddel-solubilized TRPV1 for spektroskopisk analyse. De kombinerede protokoller giver biokemiske og biofysiske værktøjer, som kan tilpasses til at lette strukturelle og funktionelle studier til pattedyr Ionkanaler i en membran-kontrolleret miljø.
