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台式固定化金属亲和层析、Polyhistidine 标记金属酶的重组与检测
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Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography, Reconstitution and Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme for the Undergraduate Laboratory
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台式固定化金属亲和层析、Polyhistidine 标记金属酶的重组与检测
DOI:
10.3791/58012-v
•
08:02 min
•
August 23, 2018
•
Keri L Colabroy
,
Katlyn Mayer
1
Department of Chemistry
,
Muhlenberg College
Capitoli
00:04
Titolo
00:34
Preparation of the IMAC Column
01:42
Purification of Polyhistidine-tagged Target by IMAC
04:32
Reconstitution of Target Protein with Fe
2+
06:43
Results: Undergraduate Performed Assay of a Polyhistidine Tagged Metalloenzyme
07:28
Conclusion
Summary
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在这里, 我们提出了一个协议, 台式固定化金属亲和层析纯化和随后重组的 polyhistidine 标签, 非血红素铁结合酶适合本科教学实验室。
Tags
Benchtop Immobilized Metal Affinity Chromatography
Polyhistidine Tagged Metalloenzyme
Undergraduate Laboratory
Non-heme Iron-binding Enzymes
Nickel-bound Nitriloacetic Acid Resin
Lysis Bind Buffer
Cell-free Crude Extracts
Flow-through
Eluent
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