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Extração de cafeína, atividade enzimática e expressão gênica de cafeína sintase de suspensões celulares de planta
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Caffeine Extraction, Enzymatic Activity and Gene Expression of Caffeine Synthase from Plant Cell Suspensions

Extração de cafeína, atividade enzimática e expressão gênica de cafeína sintase de suspensões celulares de planta

DOI:
10.3791/58166-v

•

09:11 min

•

October 02, 2018

•

, , , , ,
1Unidad de Bioquímica y Biología Molecular de Plantas,Centro de Investigación Científica de Yucatán, 2CONACYT, Facultad de Ingeniería Química, Campus de Ciencias Exactas e Ingeniería,Universidad Autónoma de Yucatán

Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 00:28Caffeine Extraction in Cell Suspension of C. arabica L.
  • 00:55Conditions for the Assessment of Caffeine by Thin Layer Chromatography (TLC) Denistometry
  • 01:29Ribonucleic Acid (RNA) Isolation
  • 02:55Incubation of RNA Transcript with Deoxyribonuclease (DNase)
  • 03:59Complementary Deoxyribonucleic Acid (cDNA) Synthesis
  • 05:03Real-Time Quantitative PCR (qPCR) to Amplify the Gene CCS1
  • 05:43Total Protein of Cell Suspensions of C. arabica L.
  • 06:26Enzymatic Assay for Caffeine Synthase
  • 07:39Results: Enzymatic Activity of Caffeine Synthase Gene Evaluated via qPCR
  • 08:30Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Este protocolo descreve uma metodologia eficiente para a extração e quantificação de cafeína em suspensões celulares de c. arabica L. e um processo experimental para avaliar a atividade enzimática da cafeína sintase com o nível de expressão de o gene que codifica esta enzima.

Tags

Caffeine ExtractionEnzymatic ActivityGene ExpressionCaffeine SynthasePlant Cell SuspensionsAnalytical ChemistryBiochimicaBiotechnologyCaffeine BiosynthesisIn Vitro Plant ModelsAcetoneTLCDensitometryRNA IsolationChloroform Isoamyl AlcoholPhenolIsopropanolEthanolDEPC-treated WaterDNase

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