/
/
Anaerob Protein oprensning og kinetisk analyse via ilt elektrode til at studere DesB Dioxygenase aktivitet og hæmning
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:33Anaerobic DesB Purification
- 02:29Anaerobic Protein Concentration, Buffer Exchange, and DesB Desalting
- 04:10Oxygen Electrode Preparation
- 05:41Oxygen Electrode Kinetic Assay
- 06:48Results: Representative DesB Dioxygenase Induction, Activity, and Inhibition
- 07:50Conclusion
Her præsenterer vi en protokol for anaerob protein oprensning, anaerob proteinkoncentration og efterfølgende kinetic karakterisering ved hjælp af en ilt elektrode system. Metoden er illustreret ved hjælp af enzymet DesB, en dioxygenase enzym, som er mere stabilt og aktiv, når renset og gemt i en anaerobt miljø.
Tags
AnaerobicProtein PurificationKinetic AnalysisOxygen ElectrodeDesB DioxygenaseEnzyme ActivityInhibitionInorganic BiochemistryOxygen-sensitive MetalsProtein ExpressionCell PelletAmylose ColumnLysozymeHigh-pressure HomogenizationNitrogen GasGlove BoxAmylose Column BufferElution BufferFerrous Ammonium SulfateDithiothreitol
