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Purificazione della proteina anaerobica e analisi cinetica tramite elettrodo di ossigeno per lo studio di inibizione e attività di Dioxygenase di Giuroma90
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Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:33Anaerobic DesB Purification
- 02:29Anaerobic Protein Concentration, Buffer Exchange, and DesB Desalting
- 04:10Oxygen Electrode Preparation
- 05:41Oxygen Electrode Kinetic Assay
- 06:48Results: Representative DesB Dioxygenase Induction, Activity, and Inhibition
- 07:50Conclusion
Qui presentiamo un protocollo per la purificazione della proteina anaerobica, la concentrazione di proteina anaerobica e successiva caratterizzazione cinetica utilizzando un sistema di elettrodi di ossigeno. Il metodo è illustrato utilizzando l'enzima Giuroma90, un enzima diossigenasi che è più stabile e attivo quando purificato e conservati in un ambiente anaerobico.
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Keywords:
AnaerobicProtein PurificationKinetic AnalysisOxygen ElectrodeDesB DioxygenaseEnzyme ActivityInhibitionInorganic BiochemistryOxygen-sensitive MetalsProtein ExpressionCell PelletAmylose ColumnLysozymeHigh-pressure HomogenizationNitrogen GasGlove BoxAmylose Column BufferElution BufferFerrous Ammonium SulfateDithiothreitol
