Rivista
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Purificação de proteínas anaeróbica e análise cinética através do eletrodo de oxigênio para estudar a inibição e atividade dioxigenase DesB
JoVE Journal
Biochimica
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JoVE Journal Biochimica
Anaerobic Protein Purification and Kinetic Analysis via Oxygen Electrode for Studying DesB Dioxygenase Activity and Inhibition
DOI:

08:31 min

October 03, 2018

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Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 00:33Anaerobic DesB Purification
  • 02:29Anaerobic Protein Concentration, Buffer Exchange, and DesB Desalting
  • 04:10Oxygen Electrode Preparation
  • 05:41Oxygen Electrode Kinetic Assay
  • 06:48Results: Representative DesB Dioxygenase Induction, Activity, and Inhibition
  • 07:50Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Aqui nós apresentamos um protocolo para a purificação da proteína anaeróbico, concentração da proteína anaeróbica e posterior caracterização cinética usando um sistema de eletrodo de oxigênio. O método é ilustrado usando a enzima DesB, uma enzima dioxigenase, que é mais estável e ativo quando purificado e armazenados em um ambiente anaeróbio.

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