/
/
CRISPR-Cas9-baseret genom Engineering til at generere Jurkat Reporter modeller for HIV-1 infektion med udvalgte Proviral Integration websteder
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:42Choice of Targeted Locus, Guide RNA (gRNA), and Targeting Vector Design
- 03:08CRISPR-Cas9-based Targeting of Jurkat Cells
- 04:36Generation of Clonal Lines and Screening for Correct Targeting
- 07:50Screening of Single-cell Clones by Flow Cytometry and PCR
- 11:46Results: Screening and Analysis of Single-cell Clones for Correct Reporter Integration
- 13:16Conclusion
Vi præsenterer en genom engineering arbejdsgang for generation af nye in vitro-modeller for HIV-1 infektion, at sammenfatte proviral integration på udvalgte genomisk lokaliteter. Målretning af HIV-Afledte reportere lettes ved CRISPR-Cas9-medieret, lokationsspecifikke genom manipulation. Der findes detaljerede protokoller for encellede klon generation, screening og korrekte målretning verifikation.
