Rivista
/
Biochimica
/
Comment quantifier la Fraction des protéines fluorescentes photoactivation en vrac et dans des cellules vivantes
JoVE Journal
Biochimica
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Biochimica
How to Quantify the Fraction of Photoactivated Fluorescent Proteins in Bulk and in Live Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Comment quantifier la Fraction des protéines fluorescentes photoactivation en vrac et dans des cellules vivantes

DOI:
10.3791/58588-v

•

11:03 min

•

January 07, 2019

•

,
1Gynecologic Oncology Division,Stanford University School of Medicine

Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 01:20Cell Culture and Transfection
  • 02:31Imaging and Photoactivation
  • 05:45Imaging Analysis and Algorithm for Ratiometric Intensity-based Quantification of Photoactivation Efficiency
  • 09:09Results: Maximizing Photoactivation Efficiency
  • 09:50Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Nous présentons ici un protocole qui implique de photoactivatable spectralement distincte génétiquement couplé et des protéines fluorescentes. Ces chimères de la protéine fluorescente permettent de quantification de la fraction de PA-FP est photoactivation être fluorescents, c'est-à-dire l’efficacité de photoactivation. Le protocole indique que les différents modes de photoactivation rendement photoactivation différentes efficacités.

Tags

Photo-activatable Fluorescent ProteinsPA-GFPPA-CherryFluorescence MicroscopyProtein ExpressionQuantificationLive CellsInternal RulersGenetically Coupled Fluorescent Proteins

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

Thermostabilisation, Expression, purification et cristallisation du Serotonin Human Transporter Bound to<em> S</em> -citalopram

Microgravimétrie dissipatif pour étudier la dynamique de la liaison des phospholipides Binding Protein annexine A2 de bicouches lipidiques solide soutenu par utilisant un résonateur à Quartz

Modification des vecteurs d’Expression Baculovirus pour produire sécrétée des protéines végétales dans des cellules d’insecte

Fluorescent coloration à l’argent des protéines dans les Gels de Polyacrylamide

À l’aide de contenu élevé d’imagerie afin de quantifier l’Engagement de cibles en cellules adhérentes

Utilisation des protéines de Fusion recombinantes dans une plate-forme de test de protéase Fluorescent et leur Renaturation en gel

Analyse de repliement des protéines, des transports et dégradation dans les cellules vivantes par radioactifs Pulse Chase

Localisation des protéines modifiées par SUMO à l’aide de protéines de piégeage du sumo fluorescent

Analyse de l’interaction des protéines marquées par fluorescence avec des microvésicules de phospholipides artificielles à l’aide de la cytométrie quantitative en flux

Purification des protéines p53 ubiquitinées à partir de cellules de mammifères

Read Article