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Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:48Design of Binding Domains (BDs) of SINEUP Constructs for Target mRNAs
- 01:48Cell Culture and SINEUPs Transfection
- 03:46Protein Extraction
- 05:32Protein Separation by SDS-PAGE and Detection of Target Proteins by Western-blot Analysis
- 07:21Imaging Analysis of SINEUPs by Semi-automated Detection Method
- 08:26Results: Analysis of Translation Upregulation by SINEUP-GFP
- 09:11Conclusion
SINEUPs sono sintetici antisenso non-codificazione RNAs, che contengono un dominio di legame (BD) e un dominio effector (ED) e up-regolare la traduzione di mRNA di destinazione. Qui, descriviamo i metodi di rilevamento per SINEUPs in linee cellulari coltivate, analisi della loro attività di promozione di traduzione mediante Western-blot e un throughput elevato semi-automatizzato sistema di imaging.
