/
/
Enkelt-trins rensning af makromolekylære komplekser ved hjælp af RNA knyttet til Biotin og et foto-cleavable Linker
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:51Substrate Preparation
- 01:28Complex Assembly
- 02:14Immobilization of the RNA/protein Complexes on Streptavidin Beads
- 04:00UV-Elution
- 05:08Sample Analysis by Silver Staining Followed by Mass Spectrometry
- 05:59Results: Analysis of UV-eluted Complexes
- 07:36Conclusion
RNA/protein komplekser renset ved hjælp af botin-streptavidin strategi er elueret løsning på denaturering betingelser i en form, der er uegnet til yderligere rensning og funktionelle analyse. Her, beskriver vi en ændring af denne strategi, der udnytter en foto-cleavable linker i RNA og en blid UV-eluering skridt, fremstilling af indfødte og fuldt funktionel RNA/protein komplekser.
