Rivista
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In Vitro Ubiquitination und Deubiquitination Assays von Nucleleosomalhistones
JoVE Journal
Biochimica
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JoVE Journal Biochimica
In Vitro Ubiquitination and Deubiquitination Assays of Nucleosomal Histones
DOI:

11:36 min

July 25, 2019

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Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 01:01GSH-agarose Affinity Purification of the GST-RING1B(1-159)-BMI1 (1-109) E3 Ubiquitin Ligase Complex
  • 02:16Purification of the BAP1/DEUBAD (ASXL2) Deubiquitinase Complex
  • 04:58Purification of the Nucleosomes from HEK293T Cells
  • 07:38Nucleosome Ubiquitination Assay Using BMI1/RING1B E3 Ubiquitin Ligase Complex and In Vitro Nucleosomal H2A DUB Assay Using BAP1/DEUBAD
  • 09:05Results: Purification, Ubiquitination, and Deubiquitination
  • 10:40Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Ubiquitination ist eine post-translationale Modifikation, die eine wichtige Rolle in zellulären Prozessen spielt und durch Deubiquitination eng koordiniert wird. Defekte in beiden Reaktionen liegen den menschlichen Pathologien zugrunde. Wir bieten Protokolle zur Durchführung von Ubiquitination und Deubiquitination Reaktion in vitro mit gereinigten Komponenten.

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