Rivista
/
Biochimica
/
Enkelt trin berigelse af en TAP-Tagged Histon Deacetylase af Filamentous svamp Aspergillus nidulans for enzymatisk aktivitetsanalyse
JoVE Journal
Biochimica
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochimica
Single-Step Enrichment of a TAP-Tagged Histone Deacetylase of the Filamentous Fungus Aspergillus nidulans for Enzymatic Activity Assay

Enkelt trin berigelse af en TAP-Tagged Histon Deacetylase af Filamentous svamp Aspergillus nidulans for enzymatisk aktivitetsanalyse

DOI:
10.3791/59527-v

•

09:07 min

•

May 01, 2019

•

, , , ,
1Division of Molecular Biology, Biocenter,Medical University of Innsbruck, 2Biology Department,Maynooth University, 3Maynooth University Human Health Research Institute

Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 00:53Inoculum Preparation
  • 01:34Growth and Harvesting of Mycelia
  • 02:36Preparation of the Protein Extract and Equilibration of the IgG Resin
  • 04:40Batch Purification of TAP-tagged HDAC
  • 06:50Results: Analysis of the Purification and Enzymatic Activity Assay
  • 08:29Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Klasse 1 Histon deacetyltransferase (hdacs) som rpda har fået betydning som potentielle mål for behandling af svampeinfektioner. Her præsenterer vi en protokol til den specifikke berigelse af TAP-Tagged RpdA kombineret med en HDAC aktivitet assay, der tillader in vitro effekt testning af Histon histondeacetylase hæmmere.

Tags

Keywords: TAP-taggedHistone DeacetylaseAspergillus NidulansEnzymatic Activity AssayClass 1 Histone DeacetylasesRpdAFungal InfectionsHDAC ComplexesFungal-specific Deacetylase InhibitorsConidiaMyceliaLyophilizationBall MillExtraction Buffer

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

check_url/it/59527?article_type=v

En Fluorescens-baseret assay phospholipid Scramblase Aktivitet
check_url/it/59527?article_type=v

Analyse af histonantistofspecifikitet med peptidmikroarrays
check_url/it/59527?article_type=v

En In Vitro Assay at opdage tRNA-Isopentenyl-Transferase aktivitet
check_url/it/59527?article_type=v

Koffein udvinding, enzymatisk aktivitet og genekspression af koffein syntase fra plante celle suspensioner
check_url/it/59527?article_type=v

Enkelt-trins rensning af makromolekylære komplekser ved hjælp af RNA knyttet til Biotin og et foto-cleavable Linker
check_url/it/59527?article_type=v

Påvisning af proteinubiquitinationssteder ved peptidberigelse og massespektrometri
check_url/it/59527?article_type=v

En kolorimetrisk analyse af citrat syntase aktivitet i Drosophila melanogaster
check_url/it/59527?article_type=v

En tilpasselig tilgang til enzymatisk produktion og rensning af Diterpenoid naturprodukter
check_url/it/59527?article_type=v

Isolering af Histone fra Sorghum Leaf Tissue for Top Down Massespektrometri Profilering af potentielle epigenetiske markører
check_url/it/59527?article_type=v

A High-Throughput Enzyme-Coupled Activity Assay to Probe Small Molecule Interaction with the dNTPase SAMHD1

Read Article