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Enrichissement en une seule étape d’une déacétylase d’histone marquée par un robinet du champignon filamenteux Aspergillus nidulans pour le dosage enzymatique d’activité
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Single-Step Enrichment of a TAP-Tagged Histone Deacetylase of the Filamentous Fungus Aspergillus nidulans for Enzymatic Activity Assay
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Enrichissement en une seule étape d’une déacétylase d’histone marquée par un robinet du champignon filamenteux Aspergillus nidulans pour le dosage enzymatique d’activité

DOI:
10.3791/59527-v

•

09:07 min

•

May 01, 2019

•

, , , ,
1Division of Molecular Biology, Biocenter,Medical University of Innsbruck, 2Biology Department,Maynooth University, 3Maynooth University Human Health Research Institute

Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 00:53Inoculum Preparation
  • 01:34Growth and Harvesting of Mycelia
  • 02:36Preparation of the Protein Extract and Equilibration of the IgG Resin
  • 04:40Batch Purification of TAP-tagged HDAC
  • 06:50Results: Analysis of the Purification and Enzymatic Activity Assay
  • 08:29Conclusion

Summary

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Les déacétylases histones de classe 1 (HDACs) comme RpdA ont gagné en importance en tant que cibles potentielles pour traiter les infections fongiques. Nous présentons ici un protocole pour l’enrichissement spécifique du RPDA TAP-Tagged combiné avec un essai d’activité HDAC qui permet le test d’efficacité in vitro des inhibiteurs de l’histone désacétylase.

Tags

Keywords: TAP-taggedHistone DeacetylaseAspergillus NidulansEnzymatic Activity AssayClass 1 Histone DeacetylasesRpdAFungal InfectionsHDAC ComplexesFungal-specific Deacetylase InhibitorsConidiaMyceliaLyophilizationBall MillExtraction Buffer

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