Rivista
/
Bioingegneria
/
בניית פלסמידים CRISPR וזיהוי יעילות נוקאאוט בתאים יונקים באמצעות מערכת כתב לוציפראז כפול
JoVE Journal
Bioingegneria
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Bioingegneria
Construction of CRISPR Plasmids and Detection of Knockout Efficiency in Mammalian Cells through a Dual Luciferase Reporter System
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

בניית פלסמידים CRISPR וזיהוי יעילות נוקאאוט בתאים יונקים באמצעות מערכת כתב לוציפראז כפול

DOI:
10.3791/59639-v

•

05:51 min

•

December 05, 2020

•

, , , , , ,
1Qingdao Agricultural University, Qingdao, China, 2University of Cantabria, Santander y Torrelavega, Spain

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:45Oligonucleotide Annealing and sgRNA/CRISPR Vector Digestion
  • 01:51Identification of the Correct Recombinant Plasmids by PCR
  • 02:42Dual-luciferase Detection
  • 04:16Results: Design of sgRNA to Target Sheep DKK2 Exon 1
  • 05:20Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

כאן, אנו מציגים פרוטוקול המתאר שיטה יעילה עבור הדור היעיל של פלסמידים המבטאים הן את אנזים CRISPR והן את RNA מדריך יחיד (sgRNAs). שיתוף פעולה של תאים יונקים עם וקטור sgRNA / CRISPR זה וקטור כתב לוציפראז כפול הבוחן תיקון הפסקה דו-גדילי מאפשר הערכה של יעילות נוקאאוט.

Tags

Keywords: CRISPRPlasmid ConstructionDual Luciferase Reporter SystemSgRNAGene EditingPCRCell TransformationBacterial ColonyRecombinant PlasmidsCell LysisDual Luciferase Assay

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

check_url/it/59639?article_type=v

המצאה של אלקטרוכימי-DNA Biosensors לגילוי Reagentless של חומצות, חלבונים ומולקולות קטנות גרעין
check_url/it/59639?article_type=v

איתור בידוד של תאים מלנומה במחזור באמצעות Flowmetry photoacoustic
check_url/it/59639?article_type=v

גילוי חיידקים וזיהוי באמצעות חיישנים אלקטרוכימיים
check_url/it/59639?article_type=v

טיפוח של תאי יונקים באמצעות מערכת פניאומטיים Bioreactor יחיד שימוש
check_url/it/59639?article_type=v

Electrotaxis מחקרים של תאי סרטן ריאות באמצעות רב-ערוצי דו-חשמלי-שדה שבב microfluidic
check_url/it/59639?article_type=v

פרוטוקול של נוקאוט גנים מרובים עכבר קטן Organoids באמצעות CISPR-concatemer
check_url/it/59639?article_type=v

דור יעיל ועריכה של נטול מזין IPSCs מתאי הלבלב האנושי באמצעות מערכת CRISPR-Cas9
check_url/it/59639?article_type=v

אורביטל טלטול התרבות של תאים בתרבית של צורת O כלי לייצר אגרגטים אחיד
check_url/it/59639?article_type=v

ייצור מדרגי של הערוץ מתיחה, כפול, צ'יפס Microfluidic איברים
check_url/it/59639?article_type=v

בניית גיליון מרובה שכבות תאי גזע Mesenchymal עם מערכת תרבות דינמית תלת-ממד

Read Article