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बीके-पॉलीओमावायरस गैर-कोडिंग नियंत्रण क्षेत्र संचालित ट्रांसक्रिप्शनल गतिविधि वाया फ्लो साइटोमेट्री का मापन
JoVE Journal
Genetica
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JoVE Journal Genetica
Measurement of BK-polyomavirus Non-Coding Control Region Driven Transcriptional Activity Via Flow Cytometry
DOI:

11:54 min

July 13, 2019

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Capitoli

  • 00:00Titolo
  • 01:15Collection of Blood and or Urine Samples and Isolation of BKPyV-DNA
  • 02:11Amplification and Sequencing of the Non-coding Control Region (NCCR)
  • 03:37Cloning of the Non-coding Control Region (NCCR) into the Dual Fluorescence Reporter
  • 05:26Transient Transfection of HEK293T Cells with the Dual Fluorescence Reporter Plasmid and Treatment with Potential Antiviral Agents
  • 07:23Fluorescence Microscopy and Flow Cytometry
  • 09:22Results and Data Interpretation
  • 11:26Conclusion

Summary

Traduzione automatica

इस पांडुलिपि में, एक प्रोटोकॉल एक द्विदिश रिपोर्टर प्लाज्मिड tdTomato और eGFP व्यक्त करने के साथ transfected HEK293T कोशिकाओं का उपयोग करके बीके-पॉलीओमावायरस ट्रांसक्रिप्शनल गतिविधि के FACS आधारित माप प्रदर्शन करने के लिए प्रस्तुत किया है। इस विधि को आगे मात्रात्मक वायरल प्रतिलेखन पर उपन्यास यौगिकों के प्रभाव का निर्धारण करने के लिए अनुमति देता है.

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