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유세포측정을 통한 BK-폴리오마바이러스 비코딩 제어 영역 구동 전사 활성 측정
JoVE Journal
Genetica
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JoVE Journal Genetica
Measurement of BK-polyomavirus Non-Coding Control Region Driven Transcriptional Activity Via Flow Cytometry
DOI:

11:54 min

July 13, 2019

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Capitoli

  • 00:00Titolo
  • 01:15Collection of Blood and or Urine Samples and Isolation of BKPyV-DNA
  • 02:11Amplification and Sequencing of the Non-coding Control Region (NCCR)
  • 03:37Cloning of the Non-coding Control Region (NCCR) into the Dual Fluorescence Reporter
  • 05:26Transient Transfection of HEK293T Cells with the Dual Fluorescence Reporter Plasmid and Treatment with Potential Antiviral Agents
  • 07:23Fluorescence Microscopy and Flow Cytometry
  • 09:22Results and Data Interpretation
  • 11:26Conclusion

Summary

Traduzione automatica

이 원고에서, 프로토콜은 tdTomato 및 eGFP를 발현하는 양방향 리포터 플라스미드로 형질감염된 HEK293T 세포를 이용하여 BK-폴리오마바이러스 전사 활성의 FACS 기반 측정을 수행하기 위해 제시된다. 이 방법은 바이러스 전사에 대한 신규 화합물의 영향을 정량적으로 결정할 수 있게 한다.

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