È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
1Department of Nephrology,University of Duisburg-Essen, University Hospital Essen, 2Institute for Virology,University of Duisburg-Essen, University Hospital Essen, 3Center for Translational Medicine, Medical Department I, Marien Hospital Herne,University Hospital of the Ruhr-University of Bochum, 4Department of Infectious Diseases, University of Duisburg-Essen,University Hospital Essen Hufelandstr
Capitoli
- 00:00Titolo
- 01:15Collection of Blood and or Urine Samples and Isolation of BKPyV-DNA
- 02:11Amplification and Sequencing of the Non-coding Control Region (NCCR)
- 03:37Cloning of the Non-coding Control Region (NCCR) into the Dual Fluorescence Reporter
- 05:26Transient Transfection of HEK293T Cells with the Dual Fluorescence Reporter Plasmid and Treatment with Potential Antiviral Agents
- 07:23Fluorescence Microscopy and Flow Cytometry
- 09:22Results and Data Interpretation
- 11:26Conclusion
Bu yazıda, tdTomato ve eGFP 'i ifade eden bir çift yönlü muhabir Plasmid ile nakledilmiş HEK293T hücrelerini kullanarak BK-polyomavirus transkripsiyon aktivitesinin FACS tabanlı ölçümünü gerçekleştirmek için bir protokol sunulmuştur. Bu yöntem daha da Nicek viral transkripsiyon üzerinde yeni bileşiklerin etkisini belirlemek için izin verir.
