/
/
Bakteriel peptid-display til udvælgelse af nye Biotinylerende enzymer
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:29Insertion of Peptide Coding Sequencing Sequence in pBAD BirA-eCPX-AP
- 01:32Generation of a BirA Library
- 03:16Selection of Bacteria Expressing Biotinylated Peptide
- 07:18Quantification of Enrichment
- 08:26Results: Model Selection with pBAD-BirA-eCPX-AP and pBAD-BirA-eCPX-AP(K10A)
- 10:00Conclusion
Her præsenterer vi en metode til at vælge for nye varianter af E. coli biotin-protein Ubiquitinligase BirA at biotinylates et specifikt mål peptid. Protokollen beskriver opførelsen af en plasmid for bakteriel visning af målet peptid, generation af en BirA bibliotek, udvælgelse og karakterisering af BirA varianter.
