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Affichage bactérien de Peptide pour la sélection des enzymes de biotinylating de roman
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Capitoli
- 00:04Titolo
- 00:29Insertion of Peptide Coding Sequencing Sequence in pBAD BirA-eCPX-AP
- 01:32Generation of a BirA Library
- 03:16Selection of Bacteria Expressing Biotinylated Peptide
- 07:18Quantification of Enrichment
- 08:26Results: Model Selection with pBAD-BirA-eCPX-AP and pBAD-BirA-eCPX-AP(K10A)
- 10:00Conclusion
Ici, nous présentons une méthode pour sélectionner pour de nouvelles variantes de la bitine-protéine E. coli ligase BirA qui biotinylates un peptide cible spécifique. Le protocole décrit la construction d'un plasmide pour l'affichage bactérien du peptide cible, la génération d'une bibliothèque BirA, la sélection et la caractérisation des variantes de BirA.
