/

/

インビトロとプランタにおけるRING型E3ユビキチンリガーゼの機能特性評価

JoVE Journal
Biochimica

This content is Free Access.

JoVE Journal Biochimica

Functional Characterization of RING-Type E3 Ubiquitin Ligases In Vitro and In Planta

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

インビトロとプランタにおけるRING型E3ユビキチンリガーゼの機能特性評価

DOI:

10.3791/60533-v

•

10:27 min

•

December 05, 2019

•

Joanna Kud, Wenjie Wang, Yulin Yuan, Allan Caplan, Joseph C. Kuhl, Louise-Marie Dandurand, Fangming Xiao

¹Department of Entomology, Plant Pathology and Nematology,University of Idaho, ²Department of Plant Sciences,University of Idaho

Capitoli

00:04Titolo
01:04Site-directed Mutagenesis
02:29Recombinant Protein Purification and In Vitro Ubiquitination Assay
03:40Agrobacterium-mediated Transient Protein Expression in Nicotiana benthamiana Leaves and In Planta Ubiquitination Assay
06:36Establishing the Link Between Enzymatic Activity and Function In Planta
07:27Results: In Vitro and In Planta Ubiquitination Assay
09:20Conclusion

Summary

Traduzione automatica

この原稿の目的は、RING型E3ユビキチンリガーゼの包括的な生化学的および機能的研究の概要を提示することです。このマルチステップパイプラインは、詳細なプロトコルを用いて、試験されたタンパク質の酵素活性を検証し、活性を機能にリンクする方法を示す。

Tags

Keywords: RING-type E3 Ubiquitin Ligases Site-directed Mutagenesis In Vitro Enzymatic Activity In Planta Functionality Ubiquitination Assay RING Domain Cys And His Residues PCR Dpn1 Digestion PMAL-c2 Vector MBP Tag SDS-PAGE PVDF Membrane Western Blotting

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

鶏の羽根や化粧品への応用からケラチンを加水分解物の準備

分離とシロイヌナズナ由来のミトコンドリアの呼吸測定

糖タンパク質 x 線結晶構造解析および生物物理学的手法によって、免疫グロブリンフォールドのキャラクタリゼーション

殺虫剤抵抗性イエバエ、イエバエのカルボキシルエステラーゼの機能特性

培養色素脱失活動の定量化

ヌクレオソームヒストンのインビトロユビキチン化とデュービキチン化アッセイ

肝癌における相撲プロテオームの濃縮、単離、同定、特性評価のためのツールとしての相撲結合エンティティ(SES)

ユビキチンおよびユビキチン様依存性翻訳後修飾のプロファイリングと有意な変化の同定

ラット膵臓組織の迅速かつ費用対効果の高いRNA抽出

ベーカー酵母サッカロミセス・セレビシエにおけるミトコンドリアゲノム発現産物の表示と可視化

Read Article