Rivista
/
Biologia
/
Samtidig affinitetberigelse af to ændringer efter oversættelser til kvantificering og lokalisering af lokaliteter på stedet
JoVE Journal
Biologia
This content is Free Access.
JoVE Journal Biologia
Simultaneous Affinity Enrichment of Two Post-Translational Modifications for Quantification and Site Localization

Samtidig affinitetberigelse af to ændringer efter oversættelser til kvantificering og lokalisering af lokaliteter på stedet

DOI:
10.3791/60780-v

•

12:11 min

•

February 27, 2020

•

, , , , ,
1Buck Institute for Research on Aging

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 01:19Desalting of Non-Enriched Proteolytic Peptides via Large-Scale Solid-Phase Extraction
  • 02:46Simultaneous Enrichment of K-acetylated and K-succinylated Peptides with Immunoaffinity Beads
  • 04:30Elution of the Peptides Bound to Antibody Beads
  • 07:02Data Acquisition Using DDA (Data-Dependent Acquisition) and DIA (Data-Independent Acquisition)
  • 10:02Results: One-pot Enrichment of PTMs
  • 11:19Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Denne arbejdsgang beskriver ydeevnen af tids- og omkostningseffektiv berigelse af flere proteinændringer efter oversættelser (PTM)samtidig til kvantitativ global proteomisk analyse. Protokollen udnytter peptid-niveau PTM berigelse med flere konjugerede antistoffer, efterfulgt af data-uafhængige erhvervelse massespektrometri analyse for at få biologisk indsigt i PTM krydstale.

Tags

Simultaneous Affinity EnrichmentPost-translational ModificationsQuantificationSite LocalizationMass SpectrometryAcetylationSuccinylationProtein ModificationsPTMsReproducibilityC18 ResinImmunoaffinity Purification

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

Principles of Site-Specific Recombinase (SSR) Technology

Heterokaryon Technique for Analysis of Cell Type-specific Localization

Detection of Post-translational Modifications on Native Intact Nucleosomes by ELISA

Quantification of Proteins Using Peptide Immunoaffinity Enrichment Coupled with Mass Spectrometry

Samtidig Multicolor Imaging af biologiske strukturer med Fluorescence Fotoaktivering Lokalisering Microscopy

Spirende Gær Protein ekstraktion og oprensning for Studiet af Function, Interactions og post-translationelle modifikationer

Identifikation af post-translationelle modifikationer til planteprotein Complexes

High Resolution Kvantificering af krystallinsk cellulose Ophobning i<em> Arabidopsis</em> Roots til Monitor Tissue-specifikke Cell Wall Ændringer

Komplet Workflow for Analyse af Histon post-translationelle modifikationer Brug Bottom-up-massespektrometri: Fra Histon Extraction til dataanalyse

Kvantificering af lokationsspecifikke Protein lysin Acetylation og Succinylation støkiometrisk ved hjælp af Data-uafhængig erhvervelse massespektrometri

Read Article