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Tradurre la purificazione dell'affinità del ribosoma (TRAP) per studiare lo sviluppo della radice di Arabidopsis thaliana su una scala specifica del tipo di cella
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Capitoli
- 00:04Introduction
- 01:08Propagation and Sterilization
- 01:36Plating
- 02:20Tissue Treatment (Optional)
- 02:51Harvesting
- 03:39Tissue Grinding and Homogenization
- 04:39Total RNA Sample Collection, Crude Extract Clearing, Bead Washing
- 05:34Immunoprecipitation
- 06:49Lab Supply Reconditioning
- 07:38Results: Representative Cell Type-Specific GFP Expression and Translational Ribosome Affinity Purification (TRAP)/Polysome RNA Quality Assessment
- 08:47Conclusion
Tradurre la purificazione dell'affinità di ribosomi (TRAP) offre la possibilità di sezionare programmi di sviluppo con una minima elaborazione di organi e tessuti. Il protocollo produce RNA di alta qualità da cellule mirate con una sottounità ribosomica denominata GFP (Proteina fluorescente verde). Gli strumenti di analisi a valle, come qRT-PCR o RNA-seq, rivelano profili di espressione specifici del tessuto e del tipo di cellula.
