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Massenspektrometrieanalyse zur Identifizierung der Ubiquitylierung von EIFP-A mit EYFP-Tags (EYFP-CENP-A)
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Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)
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Massenspektrometrieanalyse zur Identifizierung der Ubiquitylierung von EIFP-A mit EYFP-Tags (EYFP-CENP-A)

DOI:
10.3791/61138-v

•

09:02 min

•

June 10, 2020

•

, , , , , , ,
1MOE Key Laboratory of Model Animal for Disease Study, Model Animal Research Center,Nanjing University, 2Jiangsu Key Laboratory of Molecular Medicine,Medical School of Nanjing University, 3Greehey Children’s Cancer Institute, Department of Molecular Medicine,UT Health Science Center San Antonio

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:44In Vivo Ubiquitylation Assays Using pQCXIP-EYFP-CENP-A
  • 02:19Mass Spectrometry to Identify the Ubiquitylation Site of the EYFP-CENP-A K124R Mutant
  • 04:55Data Analysis
  • 06:22Results: EYFP-CENP-A K124 Mutant is Ubiquitylated and Interacts with HJURP
  • 08:12Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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CENP-A-Ubiquitylierung ist eine wichtige Voraussetzung für die CENP-A-Ablagerung am Zentromer, die durch Dimerisierung zwischen Zellteilung vererbt und für die Zelllebensfähigkeit unverzichtbar ist. Hier beschreiben wir die Analyse der Massenspektrometrie, um die Ubiquitylierung des MIT EYFP markierten CENP-A-Proteins (EYFP-CENP-A) zu identifizieren.

Tags

Keywords: Mass SpectrometryUbiquitylationEYFP-CENP-AProtein IdentificationImmunoprecipitationGFP AntibodyLysate PreparationGel ElectrophoresisCoomassie Blue StainingProtein DigestionMass Spectrometry Analysis

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