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Skalierbare Generierung von reifen Zerebellar-Organoiden aus humanen pluripotenten Stammzellen und Charakterisierung durch Immunostainierung
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1iBB – Institute for Bioengineering and Biosciences and Department of Bioengineering, Instituto Superior Técnico,Universidade de Lisboa, 2Instituto de Medicina Molecular João Lobo Antunes, Faculdade de Medicina,Universidade de Lisboa, 3The Discoveries Centre for Regenerative and Precision Medicine, Lisbon Campus,Universidade de Lisboa, 4PBS Biotech, Inc, Camarillo, CA, USA
Capitoli
- 00:04Introduction
- 00:23Seeding the Bioreactor
- 02:06Differentiation and Maturation of Aggregates
- 03:26Preparing Organoids for Cryosectioning
- 05:47Immunostaining
- 08:27Results: Efficient Cerebellar Differentiation and Maturation
- 10:09Conclusion
Dieses Protokoll beschreibt ein dynamisches Kultursystem zur Herstellung kontrollierter Größenaggregate menschlicher pluripotenter Stammzellen und zur weiteren Stimulierung der Differenzierung in Kleinhirnorganoiden unter chemisch definierten und feederfreien Bedingungen mit einem Einweg-Bioreaktor.
