Rivista
/
/
Een verbeterd protocol om te zuiveren en direct Mono-Biotinylaat Recombinant BDNF in een tube voor cellulaire trafficking studies in neuronen
JoVE Journal
Neuroscienze
Author Produced
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Neuroscienze
An Improved Protocol to Purify and Directly Mono-Biotinylate Recombinant BDNF in a Tube for Cellular Trafficking Studies in Neurons
DOI:

13:46 min

July 11, 2020

, , , ,

Capitoli

  • 00:00Introdcution
  • 00:48Transfection of HEK293 cells
  • 01:49Media Collection and Storage
  • 03:02Media Concentration and Purification
  • 04:58In vitro Mono-biotinylation Reaction
  • 06:01Biotinylation Analysis
  • 06:56Visualization of Retrograde Axonal Transport of BDNF-QD in Live Neurons
  • 07:58Represetative Results
  • 13:17Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Recombinant BDNF met een Avi sequentie (BDNFAvi) wordt op een kosteneffectieve manier geproduceerd in HEK293 cellen en wordt gezuiverd door affiniteitschromatografie. BDNFavi wordt dan direct mono-biotinylated met het enzym BirA in een buis. BDNFavi en mono-biotinylated BDNFavi behouden hun biologische activiteit in vergelijking met commercieel verkrijgbaar BDNF.

Video correlati

Read Article