/
/
Røntgenkrystallografi for å studere oligomerisk tilstand overgang av Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:04Introduction
- 01:03Activity Assay
- 02:19Apoenzyme Preparation
- 03:32Dimer Preparation
- 04:03Microseeding
- 05:01X-Ray Diffraction
- 05:48Indexation
- 06:50Molecular Replacement
- 08:04Model Building
- 09:07Results: Representative Thermotoga Maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050 Oligomeric State Transition
- 10:50Conclusion
Denne protokollen er utviklet for å studere dimer-dodecamer overgangen av TmPep1050, en M42 aminopeptidase, på strukturelt nivå. Det er en enkel rørledning som starter fra proteinrensing til røntgendatabehandling. Krystalllogenese, datasettindeksering og molekylær erstatning har blitt vektlagt gjennom et tilfelle av studier, TmPep1050H60A H307A-variant.
