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FLIM-FRET Measurements of Protein-Protein Interactions in Live Bacteria.

Medições FLIM-FRET de Interações proteína-proteína em bactérias vivas.

DOI:
10.3791/61602-v

•

09:26 min

•

August 25, 2020

•

, , , , , , , , ,
1Université de Strasbourg,Laboratoire de Bioimagerie et Pathologies, UMR CNRS 7021, 2Université de Strasbourg, UMR 7242, ESBS, 3CNRS, UMR 7242, ESBS, 4Groupe Méthode Recherche Clinique,Hôpitaux Universitaires de Strasbourg

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:41Fluorescent Tag Insertion into the Chromosomal Genome of P. aeruginosa
  • 03:02Preparation of Agarose Pad
  • 03:57Imaging with a Two-photon Microscopy Setup
  • 06:44Results: FLIM-FRET Data Visualization and Analysis
  • 08:57Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Descrevemos aqui um protocolo para caracterizar interações proteína-proteína entre duas proteínas altamente diferentes expressas em Pseudomonas aeruginosa viva usando medidas FLIM-FRET. O protocolo inclui construções de cepas de bactérias, imobilização de bactérias, rotinas de análise de dados de imagem e pós-imagem.

Tags

Keywords: FLIM-FRETProtein-protein InteractionsLive BacteriaLive CellsP.aeruginosaE.coliFluorescent ProteinsMicroscopyAgaroseGentamycin

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