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Capitoli
- 00:04Introduction
- 00:36Donor/Acceptor Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Pair Selection
- 01:13Cell Synchronization
- 01:42FRET/Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) Acquisitions
- 02:50Donor/Acceptor Pair Delta Lifetime Calculation and FLIM Value Comparison
- 03:53Results: Representative Aurora Kinase A (AURKA) FRET Biosensor and Negative Control Images
- 05:52Conclusion
L’activation de la kinase ser/Thr multifonctionnelle AURKA est caractérisée par son autophosphorylation sur Thr288. Les sondes fluorescentes s’appuyant sur FRET peuvent faire la distinction entre ses états inactif et activé. Ici, nous illustrons quelques stratégies pour l’ingénierie des sondes, ainsi qu’un protocole FRET rapide pour suivre l’activation des kinases tout au long de la mitose.
